Cristin-resultat-ID: 911125
Sist endret: 3. oktober 2012, 15:29
NVI-rapporteringsår: 2012
Resultat
Vitenskapelig artikkel
2012

Exploring the 5 '-UTR DNA region as a target for optimizing recombinant gene expression from the strong and inducible Pm promoter in Escherichia coli

Bidragsytere:
  • Laila Berg
  • Veronika Kucharova
  • Ingrid Bakke
  • Svein Valla og
  • Trygve Brautaset

Tidsskrift

Journal of Biotechnology
ISSN 0168-1656
e-ISSN 1873-4863
NVI-nivå 1

Om resultatet

Vitenskapelig artikkel
Publiseringsår: 2012
Volum: 158
Hefte: 4
Sider: 224 - 230

Importkilder

Isi-ID: 000302771900010
Scopus-ID: 2-s2.0-84859509809

Beskrivelse Beskrivelse

Tittel

Exploring the 5 '-UTR DNA region as a target for optimizing recombinant gene expression from the strong and inducible Pm promoter in Escherichia coli

Sammendrag

By using the strong and inducible Pm promoter as a model, we recently reported that the β-lactamase production (encoded by bla) can be stimulated up to 20-fold in Escherichia coli by mutating the DNA region corresponding to the 5′-untranslated region of mRNA (UTR). One striking observation was the unexpected large stimulatory effect some of these UTR variants had on the bla transcript production level. We here demonstrate that such UTR variants can also be used to improve the expression level of the alternative genes celB (encoding phosphoglucomutase) and inf-α2b (encoding human cytokine interferon α2b), which both can be expressed to high levels even with the wild-type Pm UTR DNA sequence. Our data indicated some degree of context dependency between the UTR DNA and concomitant recombinant gene sequences. By constructing and using a synthetic operon, we demonstrated that UTR variants optimized for high-level expression of probably any recombinant gene can be efficiently selected from large UTR mutant libraries. The stimulation affected both the transcript production and translational level, and such modified UTR sequences therefore clearly have a significant applied potential for improvement of recombinant gene expression processes.

Bidragsytere

Laila Berg

  • Tilknyttet:
    Forfatter
    ved Institutt for bioteknologi og matvitenskap ved Norges teknisk-naturvitenskapelige universitet

Veronika Kucharová Pettersen

Bidragsyterens navn vises på dette resultatet som Veronika Kucharova
  • Tilknyttet:
    Forfatter
    ved Institutt for bioteknologi og matvitenskap ved Norges teknisk-naturvitenskapelige universitet

Ingrid Bakke

  • Tilknyttet:
    Forfatter
    ved Institutt for bioteknologi og matvitenskap ved Norges teknisk-naturvitenskapelige universitet

Svein Valla

  • Tilknyttet:
    Forfatter
    ved Institutt for bioteknologi og matvitenskap ved Norges teknisk-naturvitenskapelige universitet

Trygve Brautaset

  • Tilknyttet:
    Forfatter
    ved Bioteknologi og nanomedisin ved SINTEF AS
1 - 5 av 5